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我公司运用基因重组技术，生产的重组人纤维连接蛋白(Recombinant Human Fibronectin,rFN)，是以单体形式存在，分子量约为210 KDa。可作为一种细胞培养基质，替换Matrigel、鼠尾胶原、血源纤连蛋白等，提高细胞贴壁率，增强细胞代谢水平，缩短细胞生长周期。另外也可直接添加到培养基中，可替换或降低血清使用量，促进细胞贴壁、迁移、移动生长、维持细胞状态。本品以冻干粉形式供货，已达到细胞培养级别，具有批次间差异小、无任何病毒感染等特点。

细胞纤连蛋白(fibronectin，FN)是一种细胞外糖蛋白，分别以可溶形式存在于体液中，或以不可溶形式存在于细胞外基质中。作为主要的细胞粘附分子之一，FN在许多重要的生理过程中起着关键性作用，如胚胎生成，伤口愈合，止血和血栓形成。纤连蛋白表达的改变，降解以及组合与大量的病理发生密切相关，包括癌症和纤维化。

FN一般以二聚体形式分泌，各个单体的分子量为220～250kDa。主要由成纤维细胞、内皮细胞、软骨细胞、神经胶质细胞和肌细胞等合成，并分布在周围。器官移植会激发一系列的免疫级联反应，FN在T细胞活化过程表现为激活因子。所有FN由同一个基因编码产生，因转录后的mRNA经组织特异性的不同切割方式生成不同的翻译产物。FN上的多个结构域能与胶原、纤维蛋白、肝素和特异性细胞膜受体结合。其中广为人知的结合域是Arg-Gly-Asp序列(RGD)，为整合素识别后调控细胞粘附。FN参与体内众多生理作用和功能，如各种细胞间的吸附和迁移，细胞骨架组装，酪氨酸磷酸化和肿瘤转移等。

• 干粉在冻干前，原液是过滤无菌的，建议用无菌的PBS溶解，不需要再过滤处理。
  
• 用20mM柠檬酸盐，250mM NaCl溶解冻干粉后，建议分装保存，避免反复冻融。
  
• 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
  
• 本制品仅作科研用途！

• 包被/铺板实验
  
  • 取出适量的重组人纤维连接蛋白(rFN)，用无菌1×PBS，pH7.2～7.4稀释至工作液浓度，终浓度参考范围50～100μg/mL。混匀后，加入到6孔板中，800μL/孔，保证工作液完全覆盖6孔板底部。
    
  • 将加有rFN工作液的6孔板，放置在4℃过夜或者37℃包被1h。
    
  • 收集6孔板中的工作液，放置4℃保存，一周内可用于其他培养瓶/板包被。
    
  • 取出rFN包被后的6孔板，加入正常的细胞培养基后，可直接接种细胞，rFN促进细胞贴壁、生长等。
    
  • 若包被后的6孔板暂不使用，放置在4℃密封保存，建议一周内使用完。
    注：包被/铺板实验中，重组人纤维连接蛋白(rFN)工作液的加入量，应根据培养皿/瓶的大小进行调整，请参见下表1。
    表1不同培养瓶/板包被时推荐rFN加入量
    

    培养皿	底面积(cm2)	推荐rFN工作液加入量
    96孔板	0.32	50μL
    24孔板	2	200μL
    12孔板	4.5	400μL
    6孔板	9.6	800μL
    35mm培养皿	8	600μL
    60mm培养皿	21	1.6mL
    25cm2培养瓶	25~28	2.0mL

• 细胞实验
  细胞培养过程中，将rFN直接加入细胞培养基中，可促进细胞贴壁、迁移、维持细胞状态等。终浓度参考范围5～50μg/mL。